Discovery of a novel glucose metabolism in cancer: The role of endoplasmic reticulum beyond glycolysis and pentose phosphate shunt

發(fā)現(xiàn)癌癥中的新型葡萄糖代謝：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)在糖酵解和磷酸戊糖途徑之外的作用

來源 Scientific Reports, Volume 6, Article number: 25092, 2016

《科學(xué)報告》，第6卷，文章編號25092，2016年

 

摘要

本研究發(fā)現(xiàn)在癌癥細胞中存在一種新型葡萄糖代謝途徑，該途徑由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的己糖-6-磷酸脫氫酶（H6PD）觸發(fā)。當(dāng)研究人員觀察二甲雙胍（MTF）對癌細胞代謝的影響時，反復(fù)發(fā)現(xiàn)FDG攝取減少而葡萄糖消耗卻顯著增加的矛盾現(xiàn)象。通過深入研究，發(fā)現(xiàn)FDG優(yōu)先通過利用H6PD的催化功能在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中積累。沉默H6PD的表達和活性不僅降低了FDG攝取和葡萄糖消耗，還引起嚴重的能量耗竭和NADPH含量減少，但不改變線粒體功能。這些數(shù)據(jù)記錄了癌癥細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中存在一種由H6PD觸發(fā)的未知葡萄糖代謝。除了基礎(chǔ)意義外，這一發(fā)現(xiàn)可改進臨床癌癥診斷，并可能代表潛在的治療靶點。

 

研究目的

本研究旨在闡明二甲雙胍對癌細胞FDG攝取和葡萄糖消耗產(chǎn)生不同影響的機制，探索超出經(jīng)典糖酵解和磷酸戊糖途徑的新型葡萄糖代謝途徑，并驗證內(nèi)質(zhì)網(wǎng)在癌癥代謝中的新功能，為改進癌癥診斷和治療提供新靶點。

 

研究思路

研究采用體外和體內(nèi)相結(jié)合的實驗方法。首先在動物模型（BALB/c小鼠）中觀察二甲雙胍對CT26和4T1腫瘤FDG攝取和葡萄糖消耗的影響，然后在多種癌細胞系中驗證這一現(xiàn)象。通過酶活性測定、Western blot、基因沉默（siRNA）等技術(shù)，研究H6PD在葡萄糖代謝中的作用。使用熒光探針和共聚焦顯微鏡觀察葡萄糖類似物在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的分布，并通過測量能量代謝指標（ATP/AMP比值、NAD+/NADH比值等）評估代謝途徑的功能意義。

 

測量的數(shù)據(jù)及研究意義

1 FDG攝取和葡萄糖消耗數(shù)據(jù)：來自圖1和圖2。研究顯示二甲雙胍處理導(dǎo)致FDG攝取減少而葡萄糖消耗增加。這一矛盾現(xiàn)象的意義在于挑戰(zhàn)了FDG-PET作為葡萄糖消耗指標的傳統(tǒng)觀點，提示存在新的代謝途徑。

 

 

2 H6PD酶活性和表達數(shù)據(jù)：來自圖3。研究表明H6PD而非G6PD參與該新途徑，其抑制會降低葡萄糖消耗和FDG攝取。意義在于確定了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的H6PD是新型葡萄糖代謝的關(guān)鍵酶。

 

3 2-NBDG在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的定位數(shù)據(jù)：來自圖4。共聚焦顯微鏡顯示葡萄糖類似物與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)探針共定位，且此共定位受處理影響。意義在于直接證實內(nèi)質(zhì)網(wǎng)參與葡萄糖代謝。

 

4 能量代謝指標數(shù)據(jù)：來自圖5。包括氧消耗、ATP合成、ATP/AMP比值、NAD+/NADH比值等。意義在于表明該途徑獨立于線粒體氧化磷酸化，但貢獻于細胞能量平衡。

 

5 細胞增殖和存活數(shù)據(jù)：來自圖6。H6PD抑制可降低癌細胞增殖和存活。意義在于提示該途徑對癌細胞生存的重要性，可能成為治療靶點。

 

結(jié)論

1 癌癥細胞中存在一種新型葡萄糖代謝途徑，該途徑由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的H6PD觸發(fā)，獨立于經(jīng)典的糖酵解和磷酸戊糖途徑。

2 該途徑貢獻于細胞能量代謝和氧化還原平衡，其抑制會導(dǎo)致能量耗竭并抑制癌細胞生長。

3 FDG-PET顯像中的FDG攝取可能主要反映H6PD途徑的活性而非整體葡萄糖消耗，這對癌癥診斷和療效評估有重要啟示。

4 靶向H6PD途徑可能為癌癥治療提供新策略。

 

使用丹麥Unisense電極測量數(shù)據(jù)的研究意義

本研究使用丹麥Unisense公司的微電極系統(tǒng)測量細胞氧消耗，這一技術(shù)具有重要的研究意義。具體而言，研究采用Unisense氧電極在25°C的封閉腔中測量氧氣消耗，使用熱控氧電極裝置（Microrespiration, Unisense A/S）。該技術(shù)能夠高精度、高時間分辨率地檢測細胞耗氧率，為評估線粒體功能提供了可靠數(shù)據(jù)。在本研究中，氧消耗測量結(jié)果顯示二甲雙胍顯著抑制了復(fù)合物I活性，降低了氧消耗和ATP合成，而H6PD抑制則不影響線粒體氧化磷酸化。這些發(fā)現(xiàn)的意義在于：首先，證實了二甲雙胍與H6PD抑制通過不同機制影響細胞代謝；其次，為新型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)葡萄糖代謝途徑獨立于線粒體功能提供了關(guān)鍵證據(jù)；最后，展示了Unisense電極在代謝研究中的實用價值，其高靈敏度能檢測細微的氧消耗變化，有助于揭示復(fù)雜的細胞代謝網(wǎng)絡(luò)。這一技術(shù)應(yīng)用為理解癌癥細胞能量代謝提供了重要工具，未來可用于篩選靶向代謝的抗癌藥物。